PRÁCTICA 3: Aprendizaje de la Técnica aséptica básica.

1.OBJETIVO.
El objetivo de esta práctica es conocer la técnica aséptica básica ya que el cultivo de las células depende de mantener las células libres de contaminación de microorganismos tales como bacterias,hongos y virus. Para ello, todos los materiales que entran en contacto con el cultivo celular deben ser estériles y las manipulaciones no deben permitir que el entorno no estéril pueda contaminar el cultivo.
2.FUNDAMENTO.
La técnica aséptica es un conjunto de acciones para disminuir los riesgos de contaminación de las muestras/cultivos celulares. Para ello hay que tener en cuenta una serie de cosas como por ejemplo la higiene personal.

HIGIENE PERSONAL

1. La utilización de batas de laboratorio y mascarillas son muy RECOMENDADAS para minimizar el riesgo de contaminación de los cultivos celulares.
2. Se debe mantener el pelo largo recogido y hablar lo mínimo durante la manipulación de los cultivos celulares.
3. Se deben usar guantes desechables en todo momento, rociando los con etanol 70% y frotandolos para desinfectar ambos guantes.

3.MATERIALES.

Los materiales que vamos a utilizar son:

Etanol 70%

Pipetas estériles de 20 ml

Medio para la práctica de técnica estéril

Tubo cónico

Auxiliar de pipeteo

Gradilla

Cabina de flujo laminar

4.PROCEDIMIENTO.

Primeramente cabe destacar que todos los alumnos de mi grupo realizamos esta práctica con agua para luego elegir a quien mejor lo hacía para que esa persona realizase el cultivo con el medio. Yo quedo descartada por ser alergica a la penicilina.

PREPARACIÓN DEL ÁREA DE TRABAJO

1.  Tenemos que esterilizar toda la superficie de la cabina con etanol 70% y un trozo de papel.
2. Reunimos todo el material necesario y limpiar cualquier material con etanol 70%.
3. Organizamos el área de trabajo para tener fácil acceso sin tener que alcanzar más de un objeto para llegar a otro y dejar un espacio amplio y claro en el centro de la superficie.

REALIZACIÓN DE LA PRÁCTICA.

Primeramente antes de realizar la práctica conectamos la cabina con rayos UV para esterilizar la superficie. A continuación desinfectamos todos los materiales necesarios con etanol 70% y lo vamos introduciendo a la cabina, una vez realizado toda la desinfección del material, nos desinfectamos las manos y comenzamos con la práctica.

1. Desenroscamos los tapones del frasco y del tubo cónico con cuidado de no pasar por encima para no contaminar la superficie. Los tapones nunca pueden ponerse de forma que el interior toque la superficie ya que perderían la esterilidad.
2.  Abrimos un poco el plástico que contiene a la pipeta estéril y colocamos nuestro auxiliar de pipeteo. Poco a poco con la mano izquierda vamos quitando el papel que envuelve a la pipeta.
3. Una vez quitado el plástico que envuelve la pipeta, iremos al frasco que contiene el agua y pipetearemos 12 ml.
4. Una vez pipeteados estos 12 ml nos dirigiremos al tubo cónico que hemos desenroscado anteriormente y lo verteremos allí, con cuidado de no pasar por encima de la superficie del tubo.
5. Una vez terminada la práctica, quitaremos la pipeta del auxiliar y la desecharemos a un vaso de precipitado etiquetado como ¨residuos¨, sacaremos los materiales utilizados y los volveremos a desinfectar.

¡Ahora es el turno de mi compañera, quien realizó la práctica con el medio real!

5.RESULTADOS Y ANÁLISIS DE RESULTADOS.

Obtuvimos como resultado 12 ml de agua.

6.CONSIDERACIONES DE SEGURIDAD.

Como he comentado en el fundamento una de los requisitos más importantes es la higiene, ya que los cultivos celulares se contaminan fácilmente. En este caso como pipeteamos agua, no pasaba nada, pero siempre hay que tener precaución.

7.GESTIÓN DE RESIDUOS.

Los residuos generados fueron desechados a un vaso de precipitados etiquetado como ¨residuos¨ durante la práctica.