PŔACTICA 15: ELECTROFORESIS.

1.OBJETIVO.

El objetivo de esta práctica es aprender a como preparar el gel de agarosa y el tampón TAE para poder realizar la correspondiente electroforesis

2.FUNDAMENTO.

Se denomina electroforesis a la técnica mediante la cual se separan las biomoléculas en disolución cuando se ven sometidas a un campo eléctrico. Se trata de una técnica fundamentalmente analítica, aunque también se puede realizar con fines preparativos.

3. MATERIALES.

Los materiales utilizados a lo largo de la práctica han sido:

 Micropipeta

Tampón TAE

2 probetas

Embudo

2 vasos de precipitados 

Agua destilada

Frasco

4.PROCEDIMIENTO.

Preparación del gel de agarosa.

Necesitaremos 0.9g de Agarosa por cada 100 ml de agua destilada. En este caso solo vamos a preparar 100 ml.

Disolvemos los polvos de agarosa en el agua. una vez mezclados, lo depositamos en un frasco y lo calentamos en el microondas hasta que empiece a burbujear.

Después de calentarlo tenemos que añadirle 4,5 µl  de Gel SAFE, haciendo que el tinte que contiene haga que podamos observar el ADN con la luz ultravioleta.

Preparación del Tampón TAE.

 Queremos preparar 300 ml de tampón, por lo que para prepararlos tenemos que poner 30 ml de Tampón TAE y 270 ml de agua destilada, ya que es 10x.

ELECTROFORESIS.

1. Cogemos el molde para hacer los geles y cerramos los extremos con los topes para que no se salga la agarosa. Depositamos la agarosa y ponemos el peine para formar los pocillos.

2. Una vez solidificado el gel de agarosa, con la ayuda de una micropipeta colocamos la muestra que contiene la muestra más el MIX PCR en cada uno de los pocillos. Antes de colocar cada muestra ponemos el + y el -. Pusimos unos 7µl en total en cada pocillo.  

3. Una vez llenados todos los pocillos lo dejamos durante 20 minutos para que luego podamos verlo a luz ultravioleta.  

Esta práctica la repetimos el lunes 01/04 y obtuvimos estos resultados:

5. INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS.

El Rh es +

6.CONSIDERACIONES DE SEGURIDAD.

-Mantener el orden en el área de trabajo para evitar cualquier accidente.

-Examinar los instrumentos antes de utilizarlos, para evitar accidente por rotura.

-Uso correspondiente de EPI.

7.GESTIÓN DE RESIDUOS.

Todos los residuos generados fueron desechados en un recipiente etiquetado como residuos.